Attività proliferante degli emociti di Ciona intestinalis

Risultato della ricerca: Other

Abstract

La proliferazione è il termine che definisce il processo di crescita delle popolazionicellulari. Nell’ematopoiesi dei Vertebrati, la cellula staminale trascorre la maggior parte delsuo ciclo vitale nello stadio G0 e si divide per produrre il progenitore staminale in gradodi proliferare attivamente. In Ciona intestinalis poco si sa circa l’ematopoiesi sebbene,alcuni autori hanno descritto nel faringe zone di proliferazione definite col termine dinoduli emopoietici e, per gli emociti cosiddetti linfocito-like, un’attività proliferativa inseguito a stimolazione. In questo lavoro viene riportata l’attività proliferante degli emociticircolanti. Gli emociti sono stati caratterizzati utilizzando un marker della proliferazione,il gene PCNA (Proliferating Cell Nuclear Antigene) già clonato, sequenziato ed utilizzatoper sintetizzare una sonda ad RNA per esperimenti di Ibridazione in situ. Al fine diottenere un arrichimento dei vari tipi emocitari è stata utilizzata la separazione su gradientedi Percoll. Gli emociti cosi ottenuti sono stati caratterizzati attraverso la colorazione diMay-Grunwald Giemsa, e l’espressione del gene PCNA è stata valutata tramite RT-PCR.Colture primarie a breve termine sono state allestite con gli emociti derivanti da ciascunabanda di Percoll e la loro vitalità e capacità proliferante è stata valutata tramite saggioMTT. I risultati dell’Ibridazione in situ hanno messo in evidenza che il trascritto delgene PCNA è presente in 4 differenti tipi di emociti: emociti linfocito-like, amebocitiialini e granulari ed URGs (Univacuolar Refractile Granulocytes). Gli esperimenti diRT-PCR hanno mostrato che gli emociti della prima, seconda e quarta banda di Percollesprimono il gene PCNA. La colorazione MayGrunwald Giemsa ha evidenziato che intali bande sono presenti prevalentemente emociti linfocito-like (LLC) , amebociti ialinie granulociti. Il saggio MTT condotto sugli emociti separati su gradiente di Percoll haevidenziato attività proliferante degli emociti della banda B2 (alta percentuale di LLC) eB4 (alta percentuale di granulociti) dopo 12h dall’inizio della coltura.
Lingua originaleItalian
Pagine178-178
Numero di pagine1
Stato di pubblicazionePublished - 2009

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