DINAMICA DELLA CROMATINA NELLA REGOLAZIONE DELL’ESPRESSIONE GENICA DURANTE L’EMBRIOGENESI DEL RICCIO DI MARE

Progetto: Research project

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Description

Mediante esperimenti di microiniezione, abbiamo recentemente condotto un’analisi mirata a caratterizzare gli elementi coinvolti nella cis-regolazione del gene alfa-H2A durante l'embriogenesi. È emerso che il silenziamento del gene allo stadio di gastrula dipende dall’isolatore genomico sns5, localizzato al 3' del gene H2A, e da un elemento di sequenza di quattro ripetizioni GAGA identificato nella regione al 5’ a monte dell’enhancer. Intendiamo studiare mediante esperimenti di immunoprecipitazione con anticorpi contro gli istoni modificati, deacitalisi istonica e fattori di trascrizione, la dinamica della cromatina nelle regioni regolative. Inoltre, utilizzeremo la tecnologia CCC (Capturing Chromosome Conformation), nota per dare informazioni sull'organizzazione spaziale dei cromosomi. Questi esperimenti ci consentiranno di verificare se il meccanismo di silenziamento comporta la formazione di un'ansa di DNA. Infine, condurremo l'analisi funzionale del promotore del gene regolatore dello sviluppo embrionale con omeobox Hbox 12 per identificarne gli elementi cis-regolativi. Per questo scopo verranno microinettati dei vettori plasmidici d'espressione del transgene GFP (Green Fluorescenze Protein) sotto il controllo di frammenti del promotore di Hbox 12. Inoltre analizzeremo l’architettura della cromatina del gene Hbox 12 per comprendere la logica che regola la specificazione cellulare lungo gli assi embrionali.
StatoAttivo
Data di inizio/fine effettiva1/1/04 → …

Fingerprint

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